尊龙凯时推出的血管平滑肌细胞诱导钙化试剂盒（货号：YJ-YD-005），规格为200ml，售价12800元。该试剂盒经过精心优化，专为血管平滑肌细胞（VSMCs）钙化研究而设计，包括了基础培养基、钙化因子以及双抗，可以有效提升VSMCs的钙化能力。

本产品仅限用于科研用途，严禁用于诊断、治疗、临床、家庭或其他目的。

试剂盒组成

试剂盒包含以下成分：

• 血管平滑肌细胞诱导钙化基础培养基：173mL
• 钙化因子：25mL
• 双抗：2mL

使用方法

制备血管平滑肌细胞诱导钙化完全培养基

1. 在使用前，将钙化因子置于2-8℃环境中过夜解冻，并轻轻晃动试剂瓶以确保均匀混合。注意：解冻后的钙化因子可能会有少量沉淀，但这并不会影响试剂盒的质量，建议不要过滤，以防流失营养成分。

2. 用75%乙醇消毒试剂盒中各瓶/管的外部，室温放置数秒以挥发酒精。

3. 在超净台中无菌操作下，打开各个瓶/管。

4. 将25mL钙化因子及2mL双抗加入173mL血管平滑肌细胞诱导钙化基础培养基，混合均匀，即可获得200mL完全培养基。须注意清洗各瓶/管，以确保所有成分都能充分混入基础培养基中。

5. 配制完的完全培养基需轻轻混匀后即可使用。如需确保无菌，可选择使用0.22μm滤膜进行进一步过滤。

培养器皿表面的包被处理

为防止诱导过程中血管平滑肌细胞浮起，建议使用促贴壁试剂对培养器皿进行表面包被。所需材料包括促贴壁试剂（AS01-001D）。

操作步骤

1. 倒入适量促贴壁试剂，充分覆盖培养器皿底面。

2. 轻摇培养器皿以确保液体均匀分布。

3. 将处理过的培养器皿在超净台下放置至少30分钟。

4. 30分钟后，弃去促贴壁试剂，待其自然风干后可用于接种细胞。注意：包被后的培养器皿可在无菌及不蒸干的条件下，4℃保存两周。

血管平滑肌细胞诱导钙化操作规程

所需材料

• 0.25%胰蛋白酶-EDTA
• 磷酸缓冲盐水（1×PBS，货号：YJ-0800）
• 血管平滑肌细胞完全培养基（货号：PriMed-YJ-004）
• 血管平滑肌细胞诱导钙化试剂盒（货号：YJ-YD-004）

操作步骤

1. 将血管平滑肌细胞培养于37℃，5% CO2的培养箱。

2. 当细胞融合度达到80-90%时，使用0.25%胰蛋白酶-EDTA消化。

3. 将处理后的细胞按2×10⁴cells/cm²的密度接种至事先包被的六孔板中，每孔添加2 mL完全培养基。

4. 继续在37℃，5% CO2的培养箱中培养。

5. 当细胞融合度约为70%时，轻轻吸去培养基，加入2 mL血管平滑肌细胞诱导钙化完全培养基。

6. 每隔2-3天更换新鲜的诱导钙化完全培养基（使用前需预热至37℃）。

7. 诱导15-20天后，根据细胞形态变化进行钙化鉴定，使用钙化鉴定试剂盒进行染色。

产品稳定性与保存条件

• 所有产品需避光保存。
• 血管平滑肌细胞诱导钙化基础培养基应在2-8℃下保存，有效期为1年；钙化因子在-20℃下保存，有效期为2年；配制好的完全培养基在2-8℃下有效期为1个月。
• 所有产品在保质期内使用，过期后需弃用。
• 为保持产品效果，请避免反复冻融。

尊龙凯时自2011年致力于生命科学和生物医学领域的研究及技术服务，品牌始终是您最值得信赖的科研合作伙伴。我们还提供多种实验服务，包括但不限于试剂盒免费代测、WB实验代做、激光共聚焦等。

如您有时间或条件的限制，无法独立完成课题研究，欢迎您与尊龙凯时联系，我们将竭诚为您提供专业的实验技术服务。