尊龙凯时的GCP-2 Elisa试剂盒专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。本试剂盒采用双抗体一步夹心法(ELISA)进行检测。
检测原理
在预先包被adropin(AD)抗体的微孔板中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体。经过温育及彻底洗涤后,利用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化作用下,TMB转化为蓝色,随后在酸性环境中转变为黄色。颜色的深浅与样品中的adropin(AD)含量成正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定反应液的光密度(OD值),进而计算样品浓度。
样品收集、处理与保存
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,避免细胞刺激,收集血液后,进行3000转/分钟离心10分钟,快速小心分离血清与红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转/分钟离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转/分钟离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,3000转/分钟离心10分钟取上清。
5. 保存:如样品不立刻检测,应按一次用量分装并冷冻保存于-20℃,避免反复冻融。解冻时在室温下进行,确保样品充分均匀解冻。
操作注意事项及试剂准备
请确保在操作过程中遵循实验室标准流程,并妥善处理各类试剂。标准品(S0-S5)的浓度分别为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
稀释20×洗涤缓冲液时,需将其与蒸馏水以1:20的比例混合,即1份20×洗涤缓冲液配19份蒸馏水。
结果判断
使用Excel绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,进行线性回归,从而依据曲线方程计算样品的浓度值。
请注意,使用尊龙凯时产品时需谨慎,确保遵循操作指引,以保证实验结果的准确性和可靠性。